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    NOD樣受體1elisa試劑盒的工作原理與實驗方法詳解

    點擊次數(shù):178  更新時間:2025-06-16
       NOD樣受體1elisa試劑盒是一種用于檢測生物樣本中NOD1蛋白表達水平的免疫學檢測工具,在感染免疫、炎癥反應(yīng)和細胞信號轉(zhuǎn)導研究中具有重要應(yīng)用價值。
      一、??工作原理:特異性抗體識別與信號放大??
      NOD樣受體1elisa試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術(shù),通過雙抗體夾心法檢測NOD1蛋白。其核心原理是:
      ??1、固相抗體捕獲??:微孔板預(yù)先包被針對NOD1蛋白的特異性捕獲抗體,樣本中的NOD1蛋白與之結(jié)合形成固相復合物。
     
      ??2、檢測抗體識別??:加入生物素標記的檢測抗體,與NOD1蛋白的另一表位結(jié)合,形成"抗體-抗原-抗體"夾心結(jié)構(gòu)。
     
      3、??信號放大系統(tǒng)??:加入酶標記的鏈霉親和素,與生物素結(jié)合形成復合物。加入顯色底物,酶催化底物產(chǎn)生可測量的顏色變化,顏色深淺與樣本中NOD1濃度成正比。
     
      4、該技術(shù)利用抗原-抗體特異性結(jié)合和酶催化信號放大,具有高靈敏度和良好的特異性。
     NOD樣受體1elisa試劑盒
      ??二、實驗方法:標準化操作流程??
      ??1、樣本準備??
      收集細胞培養(yǎng)上清、血清或組織勻漿等樣本,避免反復凍融。NOD樣受體1elisa試劑盒支持直接檢測裂解液,簡化前處理步驟。
     
      ??2、加樣與孵育??
      將樣本或標準品加入預(yù)包被抗體的微孔板中,室溫或4℃孵育1-2小時,使NOD1蛋白與固相抗體充分結(jié)合。
     
      ??3、洗滌與檢測抗體結(jié)合??
      洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后,加入生物素標記的檢測抗體,再次孵育使抗體與NOD1蛋白結(jié)合。
     
      ??4、信號標記與顯色??
      加入酶標記的鏈霉親和素,孵育后洗滌,加入顯色底物。避光反應(yīng)一定時間后終止反應(yīng)。
     
      ??5、吸光度測定與數(shù)據(jù)分析??
      使用酶標儀在特定波長下測定各孔吸光度值。通過標準曲線計算樣本中NOD1濃度,通常以O(shè)D值對標準品濃度作圖,建立線性回歸方程。
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