PCR檢測試劑盒采用一步法實時熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(One-StepRealTimeRT-PCR)，結(jié)合Taqman技術(shù)，對特異核酸進行定性或定量檢測。用于對AIV進行檢測，有助于對AIV的實驗室診斷、監(jiān)測和流行病調(diào)查。
結(jié)果成立原則
陽性對照：CT值＜30并有明顯的擴增曲線。
陰性對照：無CT值或者CT值>37，線性為直線或者輕微斜線，無明顯擴增曲線。
以上要求需同時滿足，否則本次實驗無效，需要重新進行。
PCR檢測試劑盒在整個檢測過程中的注意事項：
1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
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